2022-02-25 06:22:08
一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理,對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。眾所周知,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來,以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實驗動物,制備特異性抗體,再用這種抗體(*抗體)作為抗原去免疫動物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結合,將抗原放大,由于抗體與抗原結合后形成的免疫復合物是無色的,因此,還必須借助于組織化學方法將抗原抗體反應部位顯示出來(常用顯色劑DAB顯示為棕黃色顆粒)。通過抗原抗體反應及呈色反應,顯示細胞或組織中的化學成分,在顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物,從而能夠在細胞或組織原位確定某些化學成分的分布、含量。組織或細胞中凡是能作抗原或半抗原的物質,如蛋白質、多肽、氨基酸、多糖、磷脂,吉林提供dMMR抗體檢測試劑推薦咨詢、受體、酶,吉林提供dMMR抗體檢測試劑推薦咨詢、***、核酸及病原體等都可用相應的特異性抗體進行檢測。二,吉林提供dMMR抗體檢測試劑推薦咨詢、免疫組織化學染色方法1、按標記物質的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶。邁杰轉化醫學擁有豐富的伴隨診斷開發經驗,高質量的管理體系和高素質的研發團隊。吉林提供dMMR抗體檢測試劑推薦咨詢
發明人還提供上述任一所述的抗msh6蛋白單克隆抗體,在msh6蛋白免疫檢測中的用途。進一步地,所述免疫檢測包括免疫組織化學法,免疫印跡法和酶聯免疫法。區別于現有技術,上述技術方案依據msh6蛋白、抗原性、組成氨基酸的親疏水性以及二級結構,選擇msh6蛋白第1-100位氨基酸序列與gst蛋白融合表達,其dna編碼序列為seqid**,用大腸桿菌進行表達,得到免疫原。對小鼠進行免疫,經細胞融合、篩選和亞克隆,獲得高效分泌抗msh6蛋白單克隆抗體的單克隆細胞系abm58060-20a2-pu,以及由該細胞系所分泌的抗msh6蛋白單克隆抗體。本方案得到的抗體具有高特異性、敏感性,可以特異性識別表達msh6蛋白的細胞,適用于免疫學檢測,特別是免疫組化檢測?;旧Y果圖(左為abm58060-20a2-pu分泌的msh6,右為市售msh6)。具體實施方式實施例1重組msh6蛋白片段的制備一、抗原片段選擇依據uniprot中登錄號為p52701的蛋白質序列進行序列和二級結構分析,全長為1360個氨基酸長度的msh6蛋白含有muts超家族區域,其分子量約為152kda左右,依據通過在線服務器測的蛋白的二級結構(secondarystructure)和表面可及性(surfaceaccessibility)參數,并通過對其抗原性指數(jamesonba,:(1):181-6.)的分析結果。青海dMMR抗體檢測試劑口碑推薦邁杰轉化醫學蛋白免疫產品開發平臺可提供基于IHC平臺的體外診斷試劑盒以及蛋白抗體原料一站式開發服務。
這種類型占Lynch綜合征的絕大多數,以MLH1、MSH2、MSH6和PMS2胚系突變為主,突變率分別為32%、38%、14%和15%,攜帶后兩者與前兩者相比ai癥發生率低、發病年齡較大。(2)上皮細胞黏附分子(EpCAM,又稱liu相關鈣離子轉導信號1)基因雜合性胚系缺失。近年的研究發現,MSH2表達丟失的Lynch綜合征患者中,約5%是因位于MSH2上游的EpCAM基因3’端外顯子胚系缺失而引起的MSH2表觀遺傳學沉默,EpCAM胚系缺失的攜帶者發生結直腸ai的危險性與MSH2突變攜帶者相似,高于MSH6突變攜帶者。(3)MLH1基因啟動子胚系甲基化。有報道少數Lynch綜合征家系的MLH1基因本身并未發生突變,而是因MLH1的啟動子發生胚系甲基化而導致的MLH1表觀沉默,但攜帶此類突變的家系的外顯率尚待明確。與Lynch綜合征不同的是,多數散發性MSI-H結直腸ai并不是由錯配修復基因體細胞突變導致的,而是因MLH1基因啟動子甲基化導致MLH1基因發生表觀遺傳學沉默所致。當2個等位基因的MLH1啟動子區CpG島均發生甲基化時,MLH1基因失活,蛋白失表達,由此導致錯配修復功能異常所發生的liu與Lynch綜合征相關結直腸ai相似,均為MSI-Hliu。近期一項大宗的文獻薈萃分析結果顯示。
免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細胞成分。只有當組織細胞中存在交叉抗原時才會出現交叉反應。2、敏感性高在應用免疫組化的起始階段,由于技術上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術,那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現在由于ABC法或SP法的出現,使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結合,這樣高敏感性的抗體抗原反應,使免疫組化方法越來越方便地應用于常規病理診斷工作。3、定位準確、形態與功能相結合該技術通過抗原抗體反應及呈色反應,可在組織和細胞中進行抗原的準確定位,因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察,這樣就可以進行形態與功能相結合的研究,對病理學研究的深入是十分有意義的。邁杰轉化醫學擁有3D HISTECH Pannoramic MIDI數字化病理掃描儀及91360遠程病理系統。
dMMR(MSH6/MLH1/PMS2/MSH2)抗體檢測試劑錯配修復〈MismatchRepair,MMR)發生于DNA復制、重組及損傷修復過程,能夠識別和修復錯誤的插入、缺失和整合。人體內常見的4種錯配修復蛋白,即hMLH1、hMSH2、hMSH6、hPMS2協同發揮DNA錯配修復功能。MMR系統任何一種蛋白缺失,都會導致DNA錯配修復功能缺陷(MismatchRepairDeficiency,dMMR),產生復制錯誤或微衛顯不穩定(MicrosatelliteInstability,MSI),進而誘導liu發生。
邁杰轉化醫學的dMMR抗體檢測試劑采用免疫組織化學法(IHC)檢測liu組織中MLH1、MSH2、MSH6和、PMS2四種蛋白的表達。
備案號
PMS2抗體試劑蘇蘇械備20180570號
MSH6抗體試劑蘇蘇械備20180569號
MSH2抗體試劑蘇蘇械備20180568號
MLH1抗體試劑蘇蘇械備20180519號
產品特點**使用北歐免疫組化質控中心NordiQC推薦的IHC抗體組合。精確經多平臺平行驗證(MSI-PCR、MSI-NGS),一致性高,特異性好普適覆蓋多個主流IHC自動染色平臺,適用范圍廣便捷方法簡單易行,醫保覆蓋。 MSH2抗體試劑 蘇蘇械備20180568號.重慶個性化dMMR抗體檢測試劑誠信合作
【邁杰轉化醫學】一直以來致力于轉化醫學服務和伴隨診斷產品開發及商業化。吉林提供dMMR抗體檢測試劑推薦咨詢
5MSI在結直腸ai診斷及預后中的應用MSI在林奇綜合征中篩查診斷中的應用由于如Amsterdam標準、Bethesda標準等鑒定標準對林奇綜合征診斷缺乏穩定性和敏感性[9],目前公認的**準確、可靠地診斷林奇綜合征的方法是MMR基因測序。又因MMR基因測序的費用昂貴,因此在進行基因測序前先進行初步篩查。目前較為公認的林奇綜合征相關的初步篩查檢測包括聚合酶鏈反應(PCR)和免疫組化(IHC)。當樣本確定為MSS時,患者不可能患林奇綜合征;當樣本確定為MSI-L時,絕大部分患者不可能患林奇綜合征;當樣本確定為MSI-H時,患者患有林奇綜合征的可能性極高,需進一步進行林奇綜合征的篩查診斷。聚合酶鏈反應(PCR):PCR的結果判讀本文不做討論。IHC檢測注意事項:(1)可能會出現MMR蛋白在liu細胞核著色不完整或著色極微弱(并伴隨細胞質著色)現象,有文獻指出該現象可能是MMR基因突變(如錯義突變)或MMR蛋白特點(該現象常見于MSH6蛋白)而造成的,建議進行PCR檢測。(2)大約有ai患者其IHC檢測MLH1蛋白表達缺失。這種缺失同遺傳性無關,是MLH1啟動子雙等位基因的異常甲基化而造成的,為避免誤診,需加做BRAFV600E突變檢測。若檢測結果為陽性,可排除Lynch綜合征[10]。。吉林提供dMMR抗體檢測試劑推薦咨詢
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